蘑菇王国的野餐会上，马里奥留下装满礼物的背包后伤心离去。路易吉、碧琪公主、耀西与奇诺比奥满心疑惑，一场误会就此展开。小队一边追查背包背后隐藏的秘密，一边经历重重风波。在一次次冒险与冲突之中，伙伴们解开误会，重新理解友情的珍贵，共同守护蘑菇王国。